Optimasi Kondisi Isolasi Protein Kasar Dari Kulit Biji Kakao (Theobroma Cacao L.) Menggunakan Response Surface Methodology Dan Uji Karakterisasinya

alda ria oktavian;

Kulit biji kakao (Theobroma cacao L.) merupakan limbah agroindustri yang masih jarang dimanfaatkan, padahal berpotensi sebagai sumber protein nabati. Penelitian ini bertujuan guna mengoptimalkan proses isolasi protein dari kulit biji kakao dengan pendekatan Response Surface Methodology (RSM), serta mengkarakterisasi protein hasil isolasi untuk mengetahui kandungan nutrisi, senyawa bioaktif peptida, dan potensi biofungsionalnya. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pengadukan magnetik pada berbagai variasi pH, waktu, dan rasio pelarut. Model regresi kuadratik dari RSM menunjukkan kecocokan yang baik dengan nilai Adjusted R² sebesar 0,9490 dan predicted R² sebesar 0,9549, serta lack of fit yang tidak signifikan (p > 0,05). pH menjadi variabel yang paling berpengaruh secara statistik terhadap rendemen (p < 0,0001). Kondisi optimum ekstraksi dicapai pada pH 12, waktu 90 menit, dan perbandingan pelarut 0,100 (1:8) g/ml, dengan nilai desirability sebesar 0,996. Karakterisasi terhadap isolat kulit biji kakao menunjukkan kandungan protein sebesar 136,69%, kadar abu 5,96%, lemak 1,88%, dan kadar air 5,3%, yang masih sesuai dengan standar produk nabati. Rendemen ekstrak tertinggi diperoleh sebesar 1,33%. Hasil SDS-PAGE menunjukkan lima pita protein dengan rentang berat molekul 15–78 kDa, menandakan keberadaan fraksi protein dengan ukuran bervariasi. Spektrum FTIR memperlihatkan keberadaan gugus fungsional khas protein (amida A, I, II, III), senyawa fenolik serta polisakarida. Analisis HPLC tidak mendeteksi asam amino uji, kemungkinan akibat konsentrasi yang sangat rendah atau terikat dengan polifenol. Secara keseluruhan, hasil penelitian ini mendukung potensi kulit biji kakao sebagai sumber bahan baku produk pangan.