Uji Aktivitas Antibakteri Peptida Kulit Biji Kakao (Theobroma Cacao L.) Secara In-Vitro Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli

Reghi Aji Saputra; Etin Hariyanti;

Kulit biji kakao (Theobroma cacao L.) merupakan produk samping industri kakao yang belum dimanfaatkan secara optimal, meskipun diketahui mengandung protein yang berpotensi menghasilkan peptida bioaktif dengan aktivitas antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi potensi aktivitas antibakteri isolat protein, hidrolisat protein, dan fraksi peptida dari kulit biji kakao terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli secara in vitro. Protein diisolasi menggunakan metode presipitasi pada kondisi basa, kemudian dihidrolisis menggunakan enzim protease untuk menghasilkan hidrolisat protein. Hidrolisat selanjutnya difraksinasi menggunakan membran Molecular Weight Cut-Off (MWCO) 3 kDa untuk memperoleh fraksi peptida berdasarkan ukuran molekul. Karakterisasi sampel dilakukan menggunakan metode FTIR, SDS-PAGE, dan analisis asam amino menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Aktivitas antibakteri diuji menggunakan metode difusi cakram Kirby–Bauer dengan ampisilin sebagai kontrol positif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa proses isolasi protein menghasilkan rendemen sebesar 1,40%, sedangkan hidrolisis menghasilkan rendemen 81,15% dengan derajat hidrolisis 82,705%. Uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa isolat protein pada konsentrasi 10.000 ppm menghasilkan zona hambat sebesar 8,75 ± 1,39 mm terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan 7,89 ± 2,29 mm terhadap bakteri Escherichia coli. Hidrolisat protein juga menunjukkan aktivitas antibakteri dengan zona hambat masing-masing 6,89 ± 0,36 mm dan 6,68 ± 1,15 mm. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa peptida hasil hidrolisis protein dari limbah kulit biji kakao berpotensi sebagai sumber antibakteri alami yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan Gram negatif..