Uji Aktivitas Inhibisi Enzim Tirosinase Dari Peptida Kulit Biji Kakao (Theobroma Cacao L.) Secara In-Vitro

Keisha Albina; Hariyanti Hanifah;

Kulit biji kakao (Theobroma cacao L.) merupakan limbah agroindustri yang belum dimanfaatkan secara optimal, meskipun mengandung protein yang berpotensi menghasilkan peptida bioaktif, termasuk sebagai inhibitor enzim tirosinase dalam proses biosintesis melanin. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas inhibisi enzim tirosinase dari peptida hasil hidrolisis protein kulit biji kakao secara in vitro. Protein diekstraksi dari kulit biji kakao dan dihidrolisis menggunakan enzim protease, kemudian difraksinasi dengan ultrafiltrasi menggunakan molecular weight cut off (MWCO) 3 kDa. Karakterisasi peptida dilakukan melalui analisis kadar protein dan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Hasil analisis menunjukkan bahwa kadar protein pada isolat kulit biji kakao sebesar 55,52% ± 1,44, sedangkan pada hidrolisat sebesar 53,16% ± 2,15. Analisis HPLC menunjukkan bahwa isolat memiliki total kandungan asam amino sebesar 18,11% (w/w) dengan asam amino dominan berupa tirosin (6,31% w/w), diikuti oleh glutamat, asam aspartat, dan arginin, sedangkan hidrolisat memiliki total kandungan asam amino sebesar 7,15% (w/w) dengan asam amino dominan glutamat dan asam aspartat. Aktivitas inhibisi tirosinase diuji menggunakan substrat L-tirosin dengan asam kojat sebagai kontrol positif dan ditentukan berdasarkan nilai IC50. Hasil pengujian menunjukkan bahwa isolat protein kulit biji kakao memiliki aktivitas inhibisi paling tinggi dengan nilai IC50 sebesar 11,21 ± 5,22 μg/mL, diikuti oleh fraksi peptida 3 kDa sebesar 33,71 ± 3,35 μg/mL, dan hidrolisat protein sebesar 55,52 ± 2,65 μg/mL, sedangkan asam kojat sebagai kontrol positif memiliki nilai IC50 sebesar 35,83 ± 4,52 μg/mL. Hasil ini menunjukkan bahwa protein dan peptida kulit biji kakao berpotensi dikembangkan sebagai agen antitirosinase alami untuk aplikasi anti-hiperpigmentasi.